隨著科技的進步,在傳統的病理技術作業上高科技應用的方面越來越廣泛,像脫水、染色、特染、免疫組化這幾個方面各個廠家都推出了新機器來代替人工操作使得這些工作的效率和質量得到大幅度的提高,現在國內一些有實力的廠家也進入這個領域,我們科去年年底購入深圳達科為公司DP260型染色機用于病理技術工作里的常規HE染色,常規HE人工染色步驟多,隨意性強,質量不穩定,而全自動染色機正好避免了這些問題,通過一段時間的使用,我們根據現有的工作環境和試劑情況,摸索和制定了新的染色流程和程序,并利用DP260染色機內置的靈活、實用的功能設置,使得染色質量和效率顯著改善。現將我們使用的情況匯報如下:
我們使用的是達科為公司DP260型染色機,試劑為改良邁耶蘇木素、1%醇溶性伊紅、80%乙醇、90%乙醇、95%乙醇、無水乙醇、二甲苯、1%鹽酸乙醇、二甲苯。
方法:常規石蠟切片
HE染色,石蠟切片厚3微米,裱帖在載玻片上,在載玻片的磨砂面正確標出組織塊的編號,放入染色機配套的玻片籃中即可上機染色程序完成后自染色出口處取出切片,置入CV5030自動蓋片機中,使用中性樹膠封固。程序如圖:
結果:石蠟切片HE染色透明性好、鮮艷、均勻胞核和胞質著色良好、對比清晰。
討論
試劑選擇;北方地區冬天氣溫冷,水溫低,用一般染色機染色的話不易上色、顏色發灰,DP260自帶的加溫功能,它可以將四個站點通過水溫持續加熱并維持33到40度,而且水溫可調。我們在蘇木素的選擇了邁耶蘇木素,主要是由于哈瑞氏蘇木素在加溫的條件下會容易過氧化,出渣以致染色質量不穩定和蘇木素的使用時間過短,而邁耶蘇木素屬于半氧化蘇木素可很好地避免這些問題發生,它可以在加溫的環境下長期使用而不會有沉渣出現,染色質量在相當長的時間保持穩定,返藍我們是用流水長時間沖洗,雖然染色時間加長但好處是顏色鮮艷,不易掉色。伊紅用的是醇溶性伊紅,因為醇溶性伊紅上色快,顏色鮮艷。
2.染色程序設定和試劑位置擺放;我們科室主要從事常規病理工作,染色機的工作就是HE染色。為了提高工作效率,我們利用DP260染色機可同時設置儲存多套染色程序的功能擺放兩套蘇木素,并根據他們的位置和在染色過程中耗費時間較長的環節我們分別設定了兩套HE染色程序在工作中同時進行,使得染色速度比只有一套程序的要大大加快。
3.試劑更換;由于采用的是浸染式染色,每天各批次間切片染色質量會呈漸近式下降,且各染色缸液體會有一定的揮發和混合,因此,必須嚴格執行定期更換染液試劑以確保染色質量。我們通過DP260具有的試劑質控功能,設置試劑更換提醒、預提醒和強制更換功能,。從軟件上徹底解決這一問題,將滯后性更換變成預警性提醒可有效保證所有試劑均可及時更換,并可追溯性試劑更換記錄以備以后查詢,本科室采用的是數量和時間相結合的質控模式,在數量上如果達到三千張切片或者時間達到兩周話更換一次,每天進行質控,如效果不佳則立即更換。
DP260染色機作為一個病理技術方面的新參與者。它在繼承全自動染色機染色機的優點同時,又開發出符合現實需要并具有時代新氣象的新功能。他的局域水溫加熱功能從根本上解決了北方冬天由于氣溫過低導致染色不良的現象,還有他的強大的軟件質控功能可以大大方便技術員的試劑管理,保證病理切片通過高質量的染色獲得滿意的效果。
作者:周志強 主管技師 qlbl2013@163.com 18560081182
作者單位 250012 濟南 齊魯醫院病理科(周志強 王妍)